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专利名称：一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法

专利类型：发明专利

专利申请号：CN202410229931.2

专利申请（专利权）人：石药集团江西金芙蓉药业有限公司
权利人地址：江西省九江市彭泽县芙蓉墩镇

专利发明（设计）人：武翠红,任琦,黄丽芬,刘平霞,喻伟红

专利摘要：本发明公开了一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，涉及中药材鉴别领域领域，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备；(2)供试品溶液的测定；(3)鉴别。试验结果证明，本方法通过半夏与水半夏不同比例的混合，利用高效液相色谱方法的筛。袢∷胂那鹩诎胂牡奶卣骷鸱，该方法既可用于半夏与水半夏的鉴别，也可用于半夏中掺伪水半夏的鉴别，本发明方法稳定可靠，简单快捷，可有效监控半夏药材的质量，保证其疗效及用药安全，具有广阔的市场应用前景。

主权利要求：
1.一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，利用高效液相色谱方法对半夏和/或含有水半夏的进行筛。袢∏鹩诎胂牡奶卣骷鸱，从而判断是否有掺水半夏；
包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液；
取半夏、水半夏药材，粉碎，取混合药材粉末，加水溶解，超声处理，冷却至室温，再称定质量，用纯水补足减失的重量，摇匀后离心，经水系滤膜滤过，取滤液，即得；
S2：供试品溶液的测定；
取供试品溶液,注入高效液相色谱仪,检测,得到供试品的高效液相色谱图；
S3：液相色谱峰鉴别；
将S2中获得的高效液相色谱图在保留时间1.5?2.0的范围内，如存在特征峰，则含有水半夏，如无，则不含水半夏；
步骤S2中，色谱条件如下：
色谱柱：C18反相色谱柱；
流动相：流动相A为水，流动相B为10%乙腈；梯度洗脱：0?10min，83%?80%A；10?20min，
80%?40%A；20?30min，40%?0A；
流速：0.8 1.0mL/min；检测波长260nm；柱温20?30℃；进样量5 25μl；
~ ~
混合药材粉末在加水溶解前，对其进行以下处理：将混合药材粉末闷润使其含水率至少50%，然后在5?15℃冷风干燥，使混合药材粉末颗粒表面水分含量降低至8?10%，混合药材粉末颗粒内部水分含量保持在40?50%，接着将混合药材粉末置于?15℃以下环境中冷冻，得到混合药材粉末冰颗粒，最后升温至30?50℃干燥。
2.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，步骤S1中，粉碎后采用4号筛进行过筛。
3.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，步骤S1中，超声提取30?60min。
4.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，步骤S1中，所述水与混合药材粉末的体积重量比为25ml：1g。
5.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，步骤S1中，所述混合药材粉末中半夏与水半夏的质量比5?9：1?5。
6.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，流动相A的体积百分数为：0 10min，88% 85%A；10 20min，85% 45%A；20 30min，45% 0A；流速为~ ~ ~ ~ ~ ~
1.0mL/min。
7.根据权利要求1所述的一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，其特征在于，所述C18反相色谱柱为AgilentC18液相色谱柱，规格为4.6*250mm，5μm。 说明书 : 一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法技术领域[0001] 本发明涉及中药材鉴别领域，具体涉及一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法。背景技术[0002] 半夏为天南星科半夏属植物半夏的干燥块茎。夏、秋二季采挖，洗净，除去外皮和须根，晒干。性味：辛、温；有毒。归脾、胃、肺经。燥湿化痰,，降逆止呕，消痞散结。用于湿痰寒痰，咳喘痰多，痰饮眩悸，风痰眩晕，痰厥头痛，呕吐反胃，胸脘痞闷，梅核气；外治痈肿痰核。[0003] 半夏的伪品较多，其中天南星科的水半夏为常用伪品之一。[0004] 水半夏为天南星科犁头尖属植物鞭檐犁头尖块茎。主要用于抗过敏、抗炎、镇静、平喘治疗。性辛、温。有毒。[0005] 半夏与水半夏均属于天南科植物，性味相似，粉碎后通过外观性状显微鉴别难以区分，不法商贩通过非法添加伪品水半夏获取利益，严重影响半夏生产企业利益，同时也影响到半夏药材的质量及用药安全。[0006] 因此，是有必要探索出一种稳定可靠、简单快捷的的半夏中掺伪水半夏的鉴别方法。发明内容[0007] 本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，提供一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法。[0008] 本发明的技术解决方案如下：[0009] 一种半夏中掺伪水半夏的鉴别方法，利用高效液相色谱方法对半夏和/或含有水半夏的进行筛。袢∏鹩诎胂牡奶卣骷鸱，从而判断是否有掺水半夏。[0010] 作为本发明的优选方案，包括以下步骤：[0011] S1：制备供试品溶液；[0012] 取半夏、水半夏药材，粉碎，取混合药材粉末，加水溶解，超声处理，冷却至室温，再称定质量，用纯水补足减失的重量，摇匀后离心，经水系滤膜滤过，取滤液，即得；[0013] S2：供试品溶液的测定；[0014] 取供试品溶液,注入高效液相色谱仪,检测,得到供试品的高效液相色谱图；[0015] S3：液相色谱峰鉴别；[0016] 将S2中获得的高效液相色谱图在保留时间1.5?2.0的范围内，如存在特征峰，则含有水半夏，如无，则不含水半夏。[0017] 作为本发明的优选方案，步骤S1中，粉碎后采用4号筛进行过筛。具体4号筛的孔径为65目，具体实施时并不局限于此。[0018] 作为本发明的优选方案，步骤S1中，超声提取30?60min，优选30min。[0019] 作为本发明的优选方案，步骤S1中，所述水与混合药材粉末的体积重量比为25ml：1g。[0020] 作为本发明的优选方案，所述混合药材粉末中半夏与水半夏的质量比5?9：1?5。[0021] 作为本发明的优选方案，步骤S2中，色谱条件如下：[0022] 色谱柱：C18反相色谱柱；[0023] 流动相：流动相A为水，流动相B为10％乙腈；梯度洗脱：0?10min，83％?80％A；10?20min，80％?40％A；20?30min，40％?0A；[0024] 流速：0.8～1.0mL/min；检测波长260nm；柱温20?30℃；进样量5～25μl。[0025] 作为本发明的优选方案，流动相A的体积百分数为：0～10min，88％～85％A；10～20min，85％～45％A；20～30min，45％～0A；流速为1.0mL/min。[0026] 作为本发明的优选方案，所述C18色谱柱为AgilentC18液相色谱柱，规格为4.6*250mm，5μm。[0027] 作为本发明的优选方案，混合药材粉末在加水溶解前，对其进行以下处理：将混合药材粉末闷润使其含水率至少50％，然后在5?15℃冷风干燥，使混合药材粉末颗粒表面水分含量降低至8?10％，混合药材粉末颗粒内部水分含量保持在40?50％，接着将混合药材粉末置于?15℃以下环境中冷冻，得到混合药材粉末冰颗粒，最后升温至30?50℃干燥。[0028] 本发明的有益效果是：本发明的方法通过在半夏中添加不同比例的水半夏利用高效液相色谱方法的筛。行Ы胂暮退胂牡母鞣宸掷肟,获得了水半夏区别于半夏的特征鉴别峰，可用于半夏与水半夏的鉴别。本发明方法稳定可靠、简单快捷，可以有效监控半夏药材质量，保障了其疗效及用药安全，具有广阔的市场应用前景。本发明还通过对混合药材粉末进行处理，使得粉末颗粒的水分集中在其内部，在冰冻时，内部结冰后的体积增大，提高细胞壁冻胀效果，从而进一步提高了特征峰成分的溶出，在低含量水半夏的情况下，仍能够检测到其特征峰，大大提高了检测效果。附图说明[0029] 图1为3批不同产地半夏的色谱图，即对应批号BX230901?BX230903的半夏药材色谱图；[0030] 图2为3批不同产地水半夏的色谱图，即对应批号SBX230904?SBX230906的半夏药材色谱图；[0031] 图3为半夏与水半夏对比色谱图；[0032] 图4为在半夏中添加不同比例的水半夏与半夏对比色谱图，S1为水半夏，S2为50wt％水半夏，S3为30wt％水半夏，S4为20wt％水半夏，S5为半夏；[0033] 图5为不同比例流动相色谱图：S1：流动相A为水，流动相B为10％乙腈；梯度洗脱：0?10min，83％?80％A；10?20min，80％?40％A；20?30min，40％?0A；S2：流动相A为水，流动相B为10％乙腈：0～10min，88％～85％A；10～20min，85％～45％A；20～30min，45％～0A。具体实施方式[0034] 下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。[0035] 半夏及水半夏药材来源如表1：[0036] 表1半夏与水半夏药材的来源[0037]批号 药材名称 产地BX230901 半夏 湖北BX230902 半夏 甘肃BX230903 半夏 四川SBX230904 水半夏 广西SBX230905 水半夏 广东SBX230906 水半夏 云南[0038] 取半夏、水半夏生品进行粉碎，过4号筛，得待检样品。[0039] 试剂：乙腈(色谱纯,sigma)；纯化水。[0040] 实施例1[0041] 1、供试品溶液的制备[0042] 取半夏、水半夏药材，粉碎(过4号筛)，取约1.0g，精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入水25ml，称定质量，超声处理(功率1130W、频率37kHZ)30～60min，冷却至室温，再称定质量，用纯水补足减失的重量，摇匀后4000r/min离心10min，经0.45μm水系滤膜滤过，取续滤液即得。[0043] 2、色谱条件[0044] 流动相A为水，流动相B为10％乙腈；[0045] 梯度洗脱：0～10min，88％～85％A；10～20min，85％～45％A；20～30min，[0046] 45％～0A；[0047] 色谱柱；AgilentC18液相色谱柱(4.6*250mm，5μm)；[0048] 流速：1.0mL/min；[0049] 检测波长：260nm；[0050] 柱温：20℃；[0051] 进样量：20μL。[0052] 3、结果[0053] (1)3份不同产地半夏样品色谱图如图1所示。[0054] (2)3份不同产地水半夏样品色谱图如图2所示。[0055] (3)水半夏和半夏的对比色谱图如图3所示。在1.5～2min范围，水半夏有一个区别于半夏的特征峰，可用于半夏与水半夏的鉴别。[0056] 通过以上鉴别，找到了水半夏区别于半夏的特征峰，可有效的用于水半夏的鉴别，也可用于鉴别半夏生品中掺伪水半夏的情况。[0057] 实施例2[0058] 在半夏中添加不同比例水半夏制备不同的样品，进样检测，验证该方法的可行性。[0059] 1、水半夏的添加比例[0060] 取半夏药材粉末、水半夏药材粉末，分别按照质量比9:1、8:2、5:5进行混合，混合后取样。按照实施例1中发明方法进行色谱鉴别。结果如图4所示，从图中可以看出，S2?S4的图谱均找到了水半夏区别于半夏的特征鉴别峰，可用于半夏与掺杂不同含量水半夏的鉴别。[0061] 取半夏药材粉末、水半夏药材粉末，按照质量比9.5:0.5进行混合，分别按照实施例1和以下方法(改进方法)进行色谱鉴别，结果发现，改进方法测得的色谱，水半夏的特征峰桁架明显，因此，该方法更利于在低含量水半夏的情况下进行鉴别。[0062] 方法：与实施例1不同的是，混合药材粉末在加水溶解前，对其进行以下处理：将混合药材粉末闷润使其含水率至少50％，然后在10℃冷风干燥，使混合药材粉末颗粒表面水分含量降低至9％，混合药材粉末颗粒内部水分含量保持在45％，接着将混合药材粉末置于?15℃以下环境中冷冻，得到混合药材粉末冰颗粒，最后升温至45℃干燥。[0063] 2、水半夏与溶剂比例考察，具体见表2；[0064] 水半夏药材，粉碎(过4号筛)，取约1.0g,精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入水分别20ml、25ml、30ml称定质量，超声处理，冷却至室温，再称定质量，用纯水补足减失的重量，摇匀后4000r/min离心10min，经0.45μm水系滤膜滤过，取续滤液，上样。[0065] 表2水半夏与溶剂比例考察[0066][0067][0068] 结果显示，药材与溶剂比例为1:25，峰面积最高，超声提取效果最好。[0069] 3、超声时间的考察，具体见表3；[0070] 表3超声时间的考察[0071] 超声时间 30min 45min 60min峰面积 181 175 168[0072] 结果显示，综合超声时间及峰面积考虑，超声30min最适宜。[0073] 4、色谱条件考察[0074] (1)检测波长考察[0075] 经全波长扫描，特征鉴别峰最大吸收波长为260nm，故检测波长为260nm。[0076] (2)流动相考察[0077] 考察了流动相A(水)：B(10vt％乙腈)不同梯度洗脱：(S1)[0078] 0?10min，83％?80％A；10?20min，80％?40％A；20?30min，40％?0A；[0079] (S2)0～10min，88％～85％A；10～20min，85％～45％A；20～30min，45％～0A；流速为1.0mL/min。结果如图5所示。[0080] 通过色谱图对比，梯度洗脱方法(S1)峰分离度不行，不能明显区分该特征峰。梯度洗脱方法(S2)可明显实现水半夏特征峰鉴别。[0081] (3)柱温考察[0082] 分别考察20℃、30℃、40℃。结果见表4。[0083] 表4柱温考察结果[0084][0085][0086] 综合峰面积及分离度考虑，柱温优选20℃。[0087] (4)进样量考察[0088] 分别考察进样量为5、10、15、20、25μl的特征峰峰面积，具体见表5。[0089] 表5进样量考察结果[0090]进样量μl 5 10 15 20 25峰面积 42 87 130 183 221峰高 2.4 4.2 6.1 8.9 10.3[0091] 综合峰面积及色谱柱的耐用性，选择进样量20μl。[0092] (5)重复性实验[0093] 取同一批水半夏样品1.0g，共取5份，精密称定，制定5份供试品溶液，分别测定，结果见表6；[0094] 表6重复性实验结果[0095] 重复性试验 1 2 3 4 5 RSD％峰面积 181.9 182.2 178.5 181.3 180.4 0.82[0096] 结果显示本发明重复性好。[0097] (6)稳定性实验[0098] 取同一供试品溶液于不同时间分别进样20μl，测定。结果如表7所示；[0099] 表7稳定性试验结果[0100]时间 0 4 8 12 18 24 RSD％峰面积 180.1 181.5 178.8 180.8 177.2 176.6 1.1[0101] 结果显示本发明方法稳定性好。[0102] 综上所述，本方法通过提取工艺和高效液相色谱方法的筛。行Ы胂暮退胂闹械母鞣宸掷肟，找到了水半夏区别于半夏的特征鉴别峰，可用于半夏与水半夏的鉴别。本发明方法稳定可靠、简单快捷，可以有效监控半夏药材质量，保障了其疗效及用药安全，具有广阔的市场应用前景。[0103] 以上所述实施例仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，还可以做出其他各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

专利地区：江西

专利申请日期：2024-02-29

专利公开日期：2024-11-12

专利公告号：CN118090967B