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专利名称：雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用注意：申请人在申请日后补交了实验数据，但该数据并未包含在本授权公告文档中。

专利类型：发明专利

专利申请号：CN202210487039.5

专利申请（专利权）人：延安大学,延安史高品生物开云优惠体育网页版入口有限责任公司
权利人地址：陕西省延安市宝塔区圣地路580号

专利发明（设计）人：发明人:姜鸣,白占涛,魏倩,杨亮,杨清湖,刘霞

专利摘要：本发明公开了本发明雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用，通过采用自然蝎蜇构建的BmK?I镜像痛模型，模拟临床常见的自发痛、热痛敏、机械痛敏症状，从而可以看出雷氯必利和甘珀酸对自发痛、热痛敏、机械痛敏均有抑制作用，能够作为新的治疗疼痛药物靶点。

主权利要求：
1.雷氯必利和甘珀酸在制备治疗疼痛药物中的应用；
雷氯必利和甘珀酸的质量比为1:5；
通过采用自然蝎蜇构建的BmKI镜像痛模型，模拟临床常见的自发痛、热痛敏、机械痛敏症状，雷氯必利和甘珀酸对自发痛、热痛敏、机械痛敏均有抑制作用，能够作为新的治疗疼痛药物靶点。
2.一种治疗疼痛的药物，其特征在于：所述的药物中含有雷氯必利和甘珀酸；
雷氯必利和甘珀酸的质量比为1:5；
每次给药剂量是雷氯必利50μg/kg，甘珀酸250μg/kg；
所述药物的给药方式为鞘内注射。 说明书 : 雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用技术领域[0001] 本发明属于治疗疼痛药物技术领域，涉及雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用。背景技术[0002] 疼痛是一种与组织损伤及潜在损伤相关的不适感受和情感体验。它提供人体受到威胁的警报信号，是生命体不疼痛是当前严重困扰人类健康的生物医学难题之一。疼痛所呈现的持续性、慢性化、个性化在多层面制约着临床预防、诊断、治疗策略的有效选择。疼痛的表现为多样化，在临床就诊的病人中约三分之一伴有慢性痛病症(Fairbanks.EurJPharmacol,2015,24.)。就目前广为使用的镇痛药而言，阿片类镇痛药易产生成瘾性和耐受性，而非甾体类镇痛药又具有较强的肝肾毒性。因此，慢性痛并未得到有效的缓解，在临床上仍未取得理想的治疗效果。[0003] 目前已经证实多巴胺受体参与疼痛调控，如在帕金森综合征中，多巴胺表达水平下降导致疼痛的发生(WoodPB.ExpertRevNeurother,2008,8(5):781?797)。而多巴胺受体激动剂甲磺酸培高利特片(协良行)、吡贝地尔缓释片(泰舒达)等，拮抗剂氟哌啶醇、氯丙嗪等药物也已经应用于临床帕金森等精神疾病的治疗。雷氯必利(Raclorpide,RAC)作为一种多巴胺D2受体选择性阻断剂，可特异性的作用于多巴胺D2类受体中的多巴胺D2亚型受体，在多种疼痛模型中发挥重要作用。已有研究表明多巴胺D2受体参与疼痛的调控。[0004] 缝隙链接在多种机体功能调节如胚胎发育、兴奋细胞、组织稳态、细胞凋亡、代谢运输等过程中扮演至关重要的角色。甘珀酸(Carbenoxolone,CBX)是一种可逆的缝隙连接解偶联剂，可在低水平神经痛中低剂量依赖性减少两侧热痛敏和机械痛敏，在鞘内给药CBX也可显著抑制福尔马林诱发的疼痛反应，热痛敏和神经元活动(Wangetal.Pain,2014,155(2):429?435)。除此之外，缝隙链接亦可被多巴胺、去甲肾上腺素、五羟色胺等神经递质和细胞因子、生长因子、其他生物活性物质等调控。而已证实多巴胺D2受体参与疼痛过程，且有研究表明多巴胺受体可以调控缝隙链接的渗透性。[0005] 那么，多巴胺D2受体和缝隙连接通讯是否参BmKI蝎蛰痛模型中镜像痛敏的发生、发展和维持过程且雷氯必利和甘珀酸能否成为疼痛诊疗的新靶点，具有很高的研究价值和临床价值。发明内容[0006] 本发明的目的是提供雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用，为治疗疼痛和制备治疗疼痛药物提供了新的思路。[0007] 本发明所采用的技术方案是，雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用。[0008] 本发明的特征还在于，[0009] 药物中含有雷氯必利和甘珀酸。[0010] 雷氯必利和甘珀酸的质量比为1:5。[0011] 每次给药剂量是雷氯必利50μg/kg，甘珀酸250mg/kg。[0012] 药物的给药方式为鞘内注射。[0013] 本发明的有益效果是，本发明雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用，通过采用自然蝎蜇构建的BmKI镜像痛模型，模拟临床常见的自发痛、热痛敏、机械痛敏症状，从而可以看出雷氯必利和甘珀酸对自发痛、热痛敏、机械痛敏均有抑制作用，能够作为新的治疗疼痛药物靶点。附图说明[0014] 图1为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内总自发抬足次数对比图；[0015] 图2为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内总舔足时间对比图；[0016] 图3为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内痛觉大发作次数对比图；[0017] 图4为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内每5分钟自发抬足次数对比图；[0018] 图5为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的同侧机械痛敏对比图；[0019] 图6为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的对侧机械痛敏对比图；[0020] 图7为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的同侧热痛敏对比图；[0021] 图8为本发明鞘内注射不同剂量雷氯必利在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的对侧热痛敏对比图；[0022] 图9为本发明鞘内注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内总自发抬足次数对比图；[0023] 图10为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内总舔足时间对比图；[0024] 图11为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内痛觉大发作次数对比图；[0025] 图12为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的2小时内每5分钟自发抬足次数对比图；[0026] 图13为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的同侧机械痛敏对比图；[0027] 图14为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的对侧机械痛敏对比图；[0028] 图15为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的同侧热痛敏对比图；[0029] 图16为本发明注射10μg雷氯必利、50μg甘铂酸以及鞘内同时注射10μg雷氯必利和50μg甘铂酸在制备镇痛药物中的应用中缓解BmKI诱发的对侧热痛敏对比图。具体实施方式[0030] 下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。[0031] 本发明提供雷氯必利和甘珀酸在制备疼痛药物中的应用。[0032] 采用BmKI蝎蜇镜像痛模型探究雷氯必利和甘珀酸对自发痛、机械痛敏和热痛敏的抑制。[0033] 实施例1[0034] 雷氯必利和甘珀酸缓解大鼠自发痛相关行为的观察[0035] 给药方式为：在5组大鼠(每组5只大鼠，体重200±20g，编号为1#、2#、3#、4#、5#)注射蝎毒素前30min，在1#大鼠鞘内注射10μl0.9％无菌生理盐水，在2#大鼠鞘内注射10μg的雷氯必利，在3#大鼠鞘内注射50μg雷氯必利，在4#大鼠鞘内注射50μg甘珀酸，在5#大鼠鞘内注射10μg雷氯必利及50μg甘珀酸。在铺有一面玻璃镜的桌上放一高75cm支架，架上置一203×20×30cm 透明有机玻璃盒子，将5组大鼠放入有机玻璃盒子中，自桌上的镜中观察大鼠足底给药后的反应。实验前将大鼠置于透明有机玻璃盒子中30min以适应实验环境，再在每只大鼠的足底注射20μgBmKI后，放回有机玻璃盒子，持续观测自发痛行为。以每5min内大鼠自发抬足次数、舔咬足时间及嘶叫等痛觉大发作次数以来评价伤害性自发痛反应。[0036] 观察2#大鼠和3#大鼠对BmKI诱发的2小时内自发痛相关行为的影响，由图1、图2、图3、图4可以得出，注射10μg雷氯必利和50μg雷氯必利对大鼠在2h内的缩足次数、痛觉大发作次数、每5min的缩足次数基本持平，则说明雷氯必利的浓度对大鼠在2h内的缩足次数、痛觉大发作的影响不大，50μg雷氯必利较10μg雷氯必利对大鼠在2h内的舔咬足时间有明显抑制效果，但注射了雷氯必利后较未注射(1#大鼠)有明显的抑制，雷氯必利可非剂量依赖性抑制BmKI诱发的自发痛相关行为；观察2#、4#、5#大鼠2小时内自发痛相关行为的缓解情况(详见图9、图10、图11、图12)可以得出，大鼠在2h内自发缩足次数、舔咬足时间、痛觉大发作次数、每5min的缩足次数方面，5#大鼠(10μg雷氯必利和50μg甘珀酸鞘内共给药)可有效的协同抑制BmKI诱发的自发痛相关行为且明显优于雷氯必利和甘珀酸单独给药。自发痛相关反应可很好的模拟临床急性痛症状，阵发性痛觉大发作行为可以很好的模拟临床阵发性痛觉发作症状。[0037] 实施例2[0038] 雷氯必利和甘珀酸缓解大鼠双侧机械痛敏反应的观察[0039] 实施例1中自发痛基本消失后，将大鼠置于2cm×2cm钢丝网格上的20×20×30cm3透明有机玻璃盒30min以适应实验环境。以VonFrey纤维(58022,StoeltingCo.,USA)(0.6?26g)测量机械缩足反射阈值。当大鼠注射侧后足接触地面并正常负重时即可测量，从网格下刺激动物双侧后肢足底中心皮肤，每两次测量间隔20秒，VonFrey纤维的刺激强度由小到大，每根纤维弯曲至45度停留2?3秒，如果没有缩足反射，使用更大克数的纤维继续测量，测量最大值为26g，上述测量过程重复5次，取能引起50％缩足反应的最小克数值为机械缩足反射阈值。按此方法，在实验前一天进行基线测试。机械痛阈值取BmKI注射后4小时、8小时、24小时的时间点进行采集，如图5、图6、图13、图14可知，10μg雷氯必利即可显著抑制BmKI诱发的双侧机械痛敏，10μg雷氯必利和50μg甘珀酸鞘内共给药可有效的协同抑制BmKI诱发的双侧机械痛敏，可很好的模拟临床镜像痛的症状。[0040] 实施例3[0041] 雷氯必利和甘珀酸对大鼠热痛敏反应的观察[0042] 实施例1中自发痛基本消失后，将20×20×30cm3有机玻璃罩放置在一块厚度为2毫米的玻璃板上，将大鼠置于其中，玻璃下方是热痛刺激仪的红外光热探头(PL?200，成都泰盟开云优惠体育网页版入口有限公司)。辐射热刺激直接施加在大鼠双侧后足的足心处。测量自动切断(cutoff)时间为20秒，以免造成组织损伤。同一位点重复测量5次，每两次测量间隔至少20min，不同位点测量每两次间隔5min。测五次，取平均值作为热缩足反射阈值。按此方法，在实验前一天进行基线测试。热痛阈值取BmKI注射后4小时、8小时的时间点进行采集。[0043] 由图7、图8、图15和图16可知，单独给药10μg雷氯必利、50μg雷氯必利，以及10μg雷氯必利和50μg甘珀酸鞘内共给药均对BmKI诱发的热痛敏影响不大，诱发的热痛敏可以很好的模拟临床热痛觉过敏症状。

专利地区：陕西

专利申请日期：2022-05-06

专利公开日期：2024-10-22

专利公告号：CN114712368B