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专利名称：抗血清白蛋白的纳米抗体及其衍生物和应用

专利类型：实用新型专利

专利申请号：CN202410931176.2

专利申请（专利权）人：通化安睿特生物制药股份有限公司
权利人地址：吉林省通化市通化县快大茂镇团结路2177号

专利发明（设计）人：项炜,邵勇,郭兴道,卢剑清,李新,杨涛,龚国利

专利摘要：本申请涉及一种抗血清白蛋白的纳米抗体及其衍生物和应用，属于抗体技术和生物医药技术领域。本申请提供一种抗血清白蛋白的纳米抗体，所述纳米抗体能够特异性结合血清白蛋白，且所述纳米抗体具有如下的互补决定区CDRSEQ?ID?NO.2所示的CDR1、SEQ?ID?NO.3所示的CDR2、SEQ?ID?NO.4所示的CDR3。本申请公开的抗血清白蛋白的纳米抗体，与白蛋白具有高亲和力，可用于延长生物药物的半衰期，有利于提高生物药在治疗中的有益效果。

主权利要求：
1.一种抗血清白蛋白的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体能够特异性结合人血清白蛋白，且所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。
2.一种分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的纳米抗体。
3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括如SEQIDNO.5或SEQIDNO.6所示的核苷酸序列。
4.一种产品，其特征在于，所述产品选自A）C）：~
A）包含权利要求2或3所述的核酸分子的表达载体；
B）包含权利要求2或3所述的核酸分子、或A）所述表达载体的宿主细胞；
C）包含权利要求1所述纳米抗体、和/或权利要求2或3所述核酸分子、和/或A）所述表达载体、和/或B）所述宿主细胞的试剂盒。
5.一种制备权利要求1所述的纳米抗体的方法，其特征在于，所述方法包括在适合培养的条件下培养权利要求4所述宿主细胞，并分离出纳米抗体的步骤。
6.权利要求1所述的纳米抗体的用途，用于制备：a）分离纯化人血清白蛋白的磁微球或层析填料，b）定性或定量检测人血清白蛋白的检测试剂盒。 说明书 : 抗血清白蛋白的纳米抗体及其衍生物和应用技术领域[0001] 本申请涉及一种抗血清白蛋白的纳米抗体及其衍生物和应用，属于抗体技术和生物医药技术领域。背景技术[0002] 生物制品已广泛应用于疾病的预防、诊断和治疗，如疫苗、血液制品、生物技术药物和核酸类药物。然而，其中的蛋白和多肽相关药物在血清中半衰期较短，而无法达到预期功效。蛋白和多肽的清除过程包括：体内的蛋白酶降解和肾小球过滤。为了达到有效的治疗效果，往往采用高频次、高剂量或长时间用药，这可能导致药物的副作用增加和患者用药依从性差。[0003] 延长药物半衰期主要策略包含以下几种（参考高晓娟.采用融合白蛋白结合域和FcRn结合域改善CD47纳米抗体体内代谢动力学[D].2020和[2]魏莹,张哲文,陆亚敏等.长效重组蛋白药物发展动态.生物工程学报,2018,34(3):360?368）：（1）对蛋白或多肽进行突变，以降低对水解酶的敏感性，增强蛋白或多肽的稳定性，但很多半衰期延长的突变体会改变药物的活性；（2）增加蛋白质或肽的尺寸和流体动力学半径，如：聚乙二醇化（pegylation，PEG），PEG化被认为是安全且耐受性良好的，但在一些研究中发现，由于肾脏中积聚了不可降解的聚乙二醇链，在肾小管中发现空泡化现象；（3）利用FcRn（neonatalFcReceptor，新生儿Fc受体）介导的再循环机制，延长药物半衰期。人血清白蛋白（HumanSerumAlbumin，HSA）是血液中的一种天然转运蛋白，其分子量为66.5kDa，是人体血浆内含量最为丰富的蛋白质。HSA主要生理功能之一是参与多种内源性和外源性物质的运输、分布与代谢等。HSA具有较长的半衰期（约19天）、生物降解性、非免疫原性和生物相容性，被广泛应用于小分子化药、多肽、蛋白、核酸等多种治疗药物的递送。HSA能够以单分子的形式载药，如将治疗药物通过非共价、共价、基因融合的方式连接到HSA分子上。现如今HSA已成功地用于生产各种融合蛋白，例如将其与激素和细胞因子结合，以调节药代动力学特性，从而提高这些分子的治疗效果。HSA?多肽的融合方式大大增加了多肽类生物药物的分子量，给生产和转化带来了很多问题，分子量的增加也会改变药物的某些药代动力学特性，可能使其难以达到靶点所在位置，进而影响药效（参考李荣，胡维新.血清白蛋白的生物学特性研究进展[J].生命科学,2013,25(10):1022?1026和陈重，野庆松，吴锦慧.基于人血清白蛋白的药物递送系统研究进展[J].药学进展,2022,46(7):495?501）。[0004] 1993年，Hamers等人首次发现骆驼血液中存在一种缺失传统抗体的轻链和重链恒定区CH1区域的重链抗体。重链抗体的重链可变域片段称为VHH(VariabledomainofHeavychainofHeavy?chainantibody，VHH)。对VHH进行克隆并重组表达，获得只含有单个结构域的最小单元抗原结合片段，即为单域抗体(Single?domainAntibodies，sdAbs)，亦被称为纳米抗体(Nanobody)。其具有尺寸小、结构简单且免疫原性低，水溶性高，稳定性强，高特异性，高亲和力，耐高温、强酸、强碱，耐压力和不易聚集等特点（参考孙山，谭星，庞晓燕等.纳米抗体技术应用的最新进展[J].生物工程学报,2022,38(3):855?867）。Ablynx公司作为纳米抗体领域的领军企业，其Cablivi(Caplacizumab?yhdp)纳米抗体药物为全球首个获批的强效选择性双价抗血管性血友病因子（vWF）纳米抗体（参考SeanDuggan.Caplacizumab:FirstGlobalApproval[J].Drugs.2018Oct;78(15):1639?1642）。[0005] 利用抗原抗体特异性结合的特点，将蛋白药物与人血清白蛋白的特异性抗体的结合功能区融合在一起制成融合蛋白，能够有效提高蛋白和多肽药物的半衰期。由Ablynx/赛诺菲开发的已获批上市的人源化、三价的双特异性纳米抗体Ozoralizumab，其含有两个靶向TNF?α（TumorNecrosisFactor?α，肿瘤坏死因子α）的纳米抗体和一个靶向人HSA的纳米抗体，其中靶向HSA主要是为了增加抗体的半衰期（参考TsutomuTakeuchi,MasafumiKawanishi,MegumiNakanishi ,etal.PhaseII/IIIResultsofaTrialofAnti–TumorNecrosisFactorMultivalentNANOBODYCompoundOzoralizumabinPatientsWithRheumatoidArthritis[J]ArthritisRheumatol .2022Nov;74(11):1776?1785）。Ablynx已经有多款产品是以抗人血清白蛋白为长效因子而构建的融合蛋白，例如靶点为IL?6R（Interleukin?6Receptor，白介素6受体）（参考MaartenVanRoy,CedricVerverken,ElsBeirnaert,etal.Thepreclinicalpharmacologyofthehighaffinityanti?IL?6RNanobody?ALX?0061supportsitsclinicaldevelopmentinrheumatoidarthritis[J].ArthritisResTher.2015May20;17(1):135.）和RANKL（ReceptorActivatorofNuclearfactor?κBLigand，核因子κB受体活化因子配体）（参考SchoenP,JacobsS,VerschuerenK,OttevaereI,SobryS&HolzJB(2013)Anti?RANKLnanobodyALX?0141showssustainedbiomarkerinhibitioninaphaseIstudyinhealthypostmenopausalwomen.EuropeanCalci?edTissueSocietyCongress,Lisbon,Portugal.）。尽管Ablynx公司开发了此类单域抗体应用于长效性蛋白药物开发，且已有几篇专利文献报道了针对人血清白蛋白的纳米抗体（参考张大挺.一种抗人血清白蛋白的纳米抗体及其应用:202210227069.2[P].2022?09?13和B爱德华兹,D平托.结合人血清白蛋白的单结构域抗体:201980088164.5[P].2021?09?17），但对此类抗体的差异性开发，如：针对不同抗原表位、抗体亲和力不同或抗体结构（序列）不一致，为长效性蛋白药物的开发奠定了基础。因此，本发明通过定期免疫骆驼，使其产生抗人白蛋白的特异性抗体，利用噬菌体展示技术进行淘。⑼ü湍负痛蟪Ω司斜泶，最终得到具高亲和力的抗人白蛋白的单域抗体，该单域抗体为延长生物药物的半衰期奠定基。欣谔岣呱镆┰谥瘟浦械挠幸嫘Ч。发明内容[0006] 为了解决上述问题，提供了一种抗血清白蛋白的纳米抗体及其衍生物和应用，本申请公开的抗血清白蛋白的纳米抗体，与白蛋白具有高亲和力，可用于延长生物药物的半衰期，有利于提高生物药在治疗中的有益效果。[0007] 根据本申请的一个方面，提供了一种抗血清白蛋白的纳米抗体，所述纳米抗体能够特异性结合血清白蛋白，且所述纳米抗体具有如下的互补决定区CDR：[0008] SEQIDNO.2所示的CDR1、SEQIDNO.3所示的CDR2、SEQIDNO.4所示的CDR3。[0009] 可选的，所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。[0010] 根据本申请的另一个方面，提供了编码上述纳米抗体的核酸分子。[0011] 可选的，所述核酸分子包括如SEQIDNO.5或SEQIDNO.6所示的核苷酸序列。[0012] 需要说明的是，对于本领域技术人员而言可以理解，上述两个核苷酸序列为本领域技术人员基于SEQIDNO.1所示的氨基酸序列根据毕赤酵母或大肠杆菌的密码子优化获得，本领域技术人员可以进行其他优化，或者根据不同的表达工程菌进行优化，可以理解的是，编码本申请上述纳米抗体的核酸分子都应在本申请的保护范围之内。[0013] 根据本申请的另一个方面，提供了表达上述纳米抗体的载体。[0014] 可选的，所述载体包含如SEQIDNO.5或SEQIDNO.6所示的核苷酸序列。[0015] 可选的，所述载体选自pPICZαA或pET?32a(+)。[0016] 根据本申请的另一个方面，提供了表达上述纳米抗体的宿主细胞。[0017] 可选的，所述宿主细胞包含上述的核酸分子，和/或上述的载体。[0018] 可选的，所述宿主细胞为工程菌，所述工程菌选自毕赤酵母或大肠杆菌。[0019] 可选的，所述工程菌选自毕赤酵母X?33或大肠杆菌BL?21。[0020] 根据本申请的另一个方面，提供了包含上述纳米抗体氨基酸序列SEQIDNO.1作为VHH链的抗血清白蛋白抗体。[0021] 可选的，所述抗体为包含上述的纳米抗体的双特异性或多特异性抗体。[0022] 根据本申请的另一个方面，提供了包含上述纳米抗体和上述抗体的融合蛋白。[0023] 可选的，所述融合蛋白为上述纳米抗体或上述抗体与多肽或蛋白融合构建而成。[0024] 根据本申请的另一个方面，提供了上述纳米抗体或上述抗体的衍生物，所述衍生物包括与上述纳米抗体或上述抗体通过共价键或非共价键结合的修饰物。[0025] 可选的，所述通过非共价键结合的修饰物选自胶体金、胶体银或胶体碳。[0026] 可选的，所述通过共价键结合的修饰物选自彩色微球、荧光微球、磁微球、层析填料或化学小分子，所述化学小分子选自生物素、染料分子或荧光分子。[0027] 根据本申请的另一个方面，提供了上述纳米抗体或上述抗体或上述纳米抗体或抗体的衍生物的用途，用于制备：a）分离纯化血清白蛋白的磁微球或层析填料，b）定性或定量检测血清白蛋白的检测试剂盒。[0028] 根据本申请的另一个方面，提供了包含上述纳米抗体或抗体及其衍生物的缀合物，所述缀合物包括连接的治疗剂。[0029] 根据本申请的另一个方面，提供了包含上述纳米抗体或抗体及其衍生物的药物组合物。[0030] 可选的，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。[0031] 根据本申请的另一个方面，提供了一种延长药物体内半衰期的方法，所述方法包括将上述的纳米抗体与药物进行连接的步骤。[0032] 根据本申请的另一个方面，提供了一种制备上述纳米抗体的方法，所述方法包括在适合培养的条件下培养上述宿主细胞，并分离出纳米抗体的步骤。[0033] 本发明通过筛选得到一种能够高特异性识别人白蛋白的纳米抗体，该纳米抗体与白蛋白的亲和力高，可用于延长药物在体内的半衰期。[0034] 本发明还提供了该纳米抗体以毕赤酵母和大肠杆菌为宿主细胞的两种表达制备方法，有利于实现商业化生产。附图说明[0035] 此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：[0036] 图1为酵母表达3A624h?72hSDS?PAGE电泳图。其中：A.酵母表达24hSDS?PAGE电泳图；B.酵母表达48hSDS?PAGE电泳图；C.酵母表达72hSDS?PAGE电泳图。[0037] 图2为酵母表达3A624h?72hWesternblot电泳图。[0038] 图3为酵母表达3A6纯化各阶段SDS?PAGE电泳图。[0039] 图4为大肠杆菌表达3A6SDS?PAGE电泳图。[0040] 图5为大肠杆菌表达3A6进行变复性及纯化各阶段SDS?PAGE电泳图。[0041] 图6为大肠杆菌和酵母表达3A6的ELISA结合验证分析图。[0042] 图7为人白蛋白?纳米抗体3A6亲和力检测结果。具体实施方式[0043] 下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例，如无特别说明，本申请的实施例中的原料和催化剂均通过商业途径购买。本申请中大肠杆菌TG1感受态细胞购买自上海懋康生物开云优惠体育网页版入口有限公司，货号MF2384，大肠杆菌BL?21感受态细胞购买自上海懋康生物开云优惠体育网页版入口有限公司，货号MF2391，X?33酵母菌株购买自ThermoFisherscientific公司，货号C18000，成年雄性大鼠购买自江苏集萃药康生物开云优惠体育网页版入口有限公司，货号SN0159897。[0044] 本发明通过定期免疫骆驼，使其产生抗人白蛋白的特异性抗体，利用噬菌体展示技术进行淘。痔匝』竦枚喔瞿擅卓固逍蛄，其中一条命名为3A6，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。根据Kabat定义方案对CDR进行定义，CDR1氨基酸序列如SEQIDNO.2所示，CDR2氨基酸序列如SEQIDNO.3所示，CDR3氨基酸序列如SEQIDNO.4所示。另外，本发明提供了以酵母和大肠杆菌作为宿主细胞的两种表达方式，经过纯化得到具高亲和力的抗人白蛋白的纳米抗体，该纳米抗体可用于延长生物药物的半衰期，有利于提高生物药在治疗中的有益效果。[0045] 下面通过具体实施例对本申请方案进行说明。[0046] 需要说明的是，本发明实施例中所使用的各种生物和化学试剂如无特殊说明均通过常规商业途径获得，未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克。菏笛槭沂植(NewYork:ColdSpringHarborLaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。[0047] 实施例1骆驼免疫及外周血淋巴细胞分离[0048] 将重组人白蛋白与弗氏佐剂混合后通过颈部皮下多点注射的方式对骆驼进行免疫，共进行5次免疫。分别于免疫前、第4次免疫前、第5次免疫前和第5次免疫结束后2周采血，静置离心后获得血清，采用ELISA（enzymelinkedimmunosorbentassay，酶联免疫吸附试验）方法检测免疫抗体效价。第5次免疫结束后采血，离心获得外周血单核细胞（PeripheralBloodMononuclearCell,PBMC）。[0049] 实施例2噬菌体文库构建[0050] 采用Trizol法提取PBMC中总RNA，并反转录合成cDNA。经两次PCR扩增单域抗体片段，限制性内切酶酶切后连接进入噬菌体质粒，电击法转化至大肠杆菌TG1感受态细胞。采9用梯度稀释法测定库容为5.15×10。随机挑选40个单克隆进行PCR鉴定，结果阳性率为39/40。[0051] 实施例3抗人白蛋白的纳米抗体淘筛[0052] 在EP管中加入磁珠和酪蛋白，封闭1h。加入人白蛋白，孵育1h进行包被。再次用酪蛋白进行封闭后加入噬菌体文库进行结合，PBST洗涤9次，PBS洗涤1次。加入胰蛋白酶进行洗脱，并用酪蛋白进行终止，即得洗脱产物。将洗脱产物侵染TG1大肠杆菌，进行涂板，37℃过夜培养。用M13K07侵染对数期的全部菌落所培养的大肠杆菌，扩大培养。循环淘筛3轮，富集文库。将最后一次筛选菌株涂布于氨苄抗性平板，挑取单克隆菌落于无菌细胞培养板，进行ELISA检测，选出合格阳性单克隆并进行基因测序，获得多个纳米抗体序列，其中一条命名为3A6，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。[0053] 实施例4纳米抗体在毕赤酵母中的表达和纯化[0054] （1）毕赤酵母表达纳米抗体3A6[0055] 将3A6抗体基因经毕赤酵母密码子优化后克隆到酵母载体pPICZαA，优化后的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，SacI酶切线性化后电转入X?33酵母菌株，于Zeocin抗性平板筛选单克隆菌落。常规接种诱导分泌表达，每24h加入终浓度为0.5%的甲醇，诱导表达72h后收样，离心收集上清。通过SDS?PAGE测定纳米抗体3A6表达情况，结果如图1所示，其中图A、B、C分别为酵母表达24h、36h、72hSDS?PAGE电泳图；“3A6?1”、“3A6?2”为两组重复。对3A6?1组进行westernblot检测，结果如图2所示，确认纳米抗体3A6表达正确。[0056] （2）毕赤酵母表达纳米抗体3A6的纯化[0057] 将酵母表达的发酵上清液加入终浓度为25mM的咪唑，待溶解后用0.45μm滤膜过滤以待上样；用上样缓冲液平衡镍柱，待基线水平，上样，收集流穿；继续用上样缓冲液冲洗柱子至基线再度水平，改用洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱液；用脱盐缓冲液平衡脱盐柱4个柱体积，将洗脱液全部上样至脱盐柱，收集第一个出现的峰即为最后的抗体溶液。若脱盐后蛋白浓度偏低，用超滤管进行浓缩。对纯化各阶段收集液进行纯度检测，SDS?PAGE结果如图3所示，结果显示纯化后目的蛋白主条带清晰，未见明显杂带。[0058] 实施例5纳米抗体在大肠杆菌中的表达和纯化[0059] （1）大肠杆菌表达纳米抗体3A6[0060] 将3A6抗体基因经大肠杆菌密码子优化后合成的基因片段连入pET?32a(+)表达载体，优化后的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示，转化至大肠杆菌BL?21感受态细胞。将转化后的BL?21阳性克隆菌落接种到LB培养基，培养至OD600=0.6左右，加入终浓度为1mM的IPTG于20℃、250rpm进行诱导表达过夜。离心收集菌体，超声处理，离心弃上清，将包涵体进行变复性。通过SDS?PAGE测定纳米抗体3A6表达情况，结果如图4所示，IPTG诱导后蛋白表达情况良好。[0061] （2）大肠杆菌表达纳米抗体3A6的纯化[0062] 将大肠杆菌表达的变复性后溶液加入终浓度为25mM的咪唑，待溶解后用0.45μm滤膜过滤以待上样；用上样缓冲液平衡镍柱，待基线水平，上样，收集流穿；继续用上样缓冲液冲洗柱子至基线再度水平，改用洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱液；用脱盐缓冲液平衡脱盐柱4个柱体积，将洗脱液全部上样至脱盐柱，收集第一个出现的峰即为最后的抗体溶液。若脱盐后蛋白浓度偏低，用超滤管进行浓缩。对蛋白变复性及纯化各阶段收集液进行SDS?PAGE检测，结果如图5所示，纯化后目的蛋白主条带清晰，未见明显杂带。[0063] 实施例6纳米抗体ELISA结合验证[0064] 取100μL浓度为0.05μg/mL的重组人白蛋白加入到96孔板中，4℃包被过夜，拍干。用300μLPBST洗三次，加入100μL5%脱脂奶粉于37℃孵育1h进行封闭，弃去溶液后拍干。将溶解于5%脱脂奶粉中的3倍系列稀释的纳米抗体（初始浓度1μg/mL，共12个浓度梯度），加入到96孔板内，每孔100μL，37℃孵育1h，弃去溶液拍干。取1μLHRP标记的二抗（抗his）加入到10mL5%脱脂奶粉中，混匀，加入到96孔板中，每孔100μL，4℃孵育过夜。300μLPBST洗5次，加入100μL显色液（TMB），避光反应10min。加入终止液100μL，检测波长450nm处吸光度。计算各浓度纳米抗体对应的吸光度OD450均值，以OD450均值为纵坐标，抗体浓度为横坐标，绘制不同浓度人白蛋白?纳米抗体的反应曲线，以每条曲线上平坦段吸光度一半值对应的纳米抗体浓度为EC50，结果如图6所示，检测结果为：酵母表达EC50=6.39E?04μg/mL，大肠杆菌表达EC50=4.88E?04μg/mL。[0065] 实施例7人白蛋白?纳米抗体亲和力检测[0066] 采用生物膜干涉技术（BLI法）进行人白蛋白?纳米抗体3A6的亲和力检测。使用NTA生物传感器，首先将传感器浸入分析缓冲液中平衡10min，将平衡后的传感器浸入EDC?NHS混合试剂活化5min；将活化后的传感器浸入纳米抗体稀释液（100nM）中孵育10min并用乙醇胺（1M，pH8.5）进行封闭；将封闭后的传感器浸入缓冲液进行基线调零；再将传感器依次浸入梯度浓度的人白蛋白溶液（50?0.78nM）中结合5min，跑出完整的结合曲线；之后将传感器转移至PBS缓冲液中解离5min。使用1:1结合模型进行动力学分析，结果如图7所示，解离平衡常数KD=4.34E?010M，表明纳米抗体3A6与人白蛋白具有很强的结合。[0067] 实施例8半衰期延长测试[0068] 1）多肽?纳米抗体融合蛋白的表达和纯化[0069] 抗血清白蛋白纳米抗体3A6可与其他多肽分子融合表达，通过抗原抗体特异性结合的特点，与内源白蛋白进行结合，从而提高药物的半衰期。本实施例以生长激素（GH）为例，构建GH?3A6融合蛋白。将GH与纳米抗体3A6通过G4S柔性连接子连接，合成融合蛋白基因片段，克隆到酵母载体pPICZαA，经SacI酶切线性化后电转入X?33酵母菌株，于Zeocin抗性平板筛选单克隆菌落。常规接种诱导分泌表达，每24h加入终浓度为0.5%的甲醇，诱导表达72h后收样，离心收集上清。将发酵上清液加入终浓度为25mM的咪唑，待溶解后用0.45μm滤膜过滤以待上样；用上样缓冲液平衡镍柱，待基线水平，上样，收集流穿；继续用上样缓冲液冲洗柱子至基线再度水平，改用洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱液；用脱盐缓冲液平衡脱盐柱4个柱体积，将洗脱液全部上样至脱盐柱，收集第一个出现的峰即为目的蛋白溶液。若脱盐后蛋白浓度偏低，用超滤管进行浓缩。[0070] 2）蛋白半衰期检测[0071] 取6只成年雄性大鼠随机分为2组，分别注射GH国家标准品（批号：150534?201602）和GH?3A6融合蛋白，按1mg/kg剂量皮下注射，分别在不同时间点取血测定血清中GH和GH?3A6含量，计算各样品在体内半衰期，结果见下表1。[0072] 表1半衰期延长测试结果[0073][0074] 结果显示，GH?3A6融合蛋白对比GH国家标准品，半衰期延长了约14倍，表明抗血清白蛋白纳米抗体可以显著提高药物分子在体内的半衰期。[0075] 以上所述，仅为本申请的实施例而已，本申请的保护范围并不受这些具体实施例的限制，而是由本申请的权利要求书来确定。对于本领域技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的技术思想和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

专利地区：吉林

专利申请日期：2024-07-12

专利公开日期：2024-10-01

专利公告号：2024-10-01