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开云优惠体育网页版入口名称：骨髓间充质干细胞源性外泌体介导miRNA-125b对骨肉瘤细胞增殖作用的实验研究

开云优惠体育网页版入口完成单位：兰州大学第二医院

开云优惠体育网页版入口完成人：齐进;郝俊龙;王旭;周雅丽;邵鹏昇

所属行业：科学研究和技术服务业

开云优惠体育网页版入口登记号：9622022J0115

开云优惠体育网页版入口简介：

课题来源：该课题来自甘肃省青年开云优惠体育网页版入口基金计划项目。
背景：骨肉瘤是儿童和青少年最常见的原发性恶性骨肿瘤，复发和转移（以肺转移多见）是导致骨肉瘤治疗不理想的主要原因，然而骨肉瘤的发生、发展机制尚不清楚。
研究目的、意义以及主要论点与论据：
间充质干细胞（Mesenchymalstemcells,MSCs）在骨肉瘤增殖与转移中存在千丝万缕的联系；前期研究发现MSCs对骨肉瘤的增殖与侵袭起到促进作用；MSCs能够显著上调骨肉瘤细胞Hedgehog信号通路相关蛋白表达。在此过程中MSCs与骨肉瘤细胞通过外泌体进行生物信息交流，从而为骨肉瘤细胞营造其增殖与转移的肿瘤微环境，并且源源不断为骨肉瘤细胞提供其增殖所需的生物活性分子如miRNA等。然而，前期研究中我们并未阐明骨髓MSCs源性外泌体促进骨肉瘤细胞增殖的具体分子生物学机制。新近的研究发现，肿瘤微环境中骨髓MSCs以及骨髓MSCs外泌体存在多种miRNA、mRNA、脂质体、蛋白质等多种成分，miRNA-21/miRNA125b等又是被公认的具有促进肿瘤细胞增殖的癌基因，在骨肉瘤细胞增殖、肿瘤相关血管生成及肿瘤转移等过程中起到重要作用。miRNA在肿瘤微环境中没有被RNA酶降解，是因为miRNA存在于外泌体而保护其免遭肿瘤微环境中RNA酶降解。综上，基于目前的研究和我们的研究基。颐侨衔覯SCs源性外泌体角度研究MSCs介导miRNA参与骨肉瘤细胞增殖并影响骨肉瘤细胞信号通路的调控改变，是具有重要的细胞分子生物学意义。
传统观点认为肿瘤微环境中MSCs与肿瘤细胞相互作用多集中在细胞与细胞之间直接接触或者通过分泌细胞因子进行细胞信号转递。而本课题的特色之处在于从外泌体旁分泌的角度研究骨肉瘤微环境中MSCs对骨肉瘤细胞增殖作用的影响。为进一步阐明骨髓MSCs参与骨肉瘤细胞增殖的分子生物学机制，本课题从人骨肉瘤、癌旁及骨髓组织、细胞功能实验以及动物模型分析MSCs源性外泌体与骨肉瘤细胞miRNA—增殖信号通路的相关性，科学性更强。该研究国内外未见文献报道。
创见与创新：
本研究对人骨肉瘤组织、癌旁组织微环境中MSCs的分离、培养，研究其MSCsmiRNA-21水平变化差异，实验研究更符合实际、研究价值更高、更具有说服力；实验有效降低了细胞、动物实验中产生的难以避免的误差，例如实验室培养骨肉瘤细胞单一，培养基与肿瘤组织基质存在差异等多种混杂因素。其次，通过对骨髓MSCs在不同骨肉瘤细胞以及正常成骨细胞诱导下其miRNA-21表达变化差异以及骨髓MSCs源性外泌体miRNA-21水平变化差异，实验证实肿瘤微环境下骨髓MSCs上调miRNA-21表达并通过其外泌体介导miRNA-21参与骨肉瘤细胞的增殖假说；对MSCs转染antagomiRNA-21,反面进一步佐证肿瘤微环境中MSCs源性外泌体通过miRNA-21参与骨肉瘤细胞的增殖假说。小鼠皮下移植瘤的建立与传代以及原位移植瘤模型的建立与小动物活体成像仪动态观察肿瘤微环境中MSCs源性外泌体通过miRNA-21参与骨肉瘤原位移植瘤生长过程。实验进一步佐证肿瘤微环境下MSCs源性外泌体介导miRNA-21—增殖信号通路参与骨肉瘤细胞增殖机制假说。
社会经济效益：
（1）技术和理论：课题完成后可以阐明MSCs源性外泌体介导miRNA-21参与骨肉瘤细胞的增殖，课题进一步从分子生物学水平证实MSCs源性外泌体介导miRNA-21—Hedgehog信号通路参与骨肉瘤细胞增殖的作用机制，为下一步骨肉瘤细胞药物靶向治疗提供理论基。
（2）论文发表、专利授权：发表SCI论文1篇，国内学术期刊发表论文1篇，授权新型实用型专利1项。阶段性获得的论文可投稿参加开云优惠体育网页版入口外泌体与疾病研讨会，推动这一领域研究工作的发展；
（3）人才培养：协助培养骨肉瘤基础研究型硕士研究生1名、本科生1名。
存在的问题：
骨肉瘤微环境相当复杂，该课题单从MSCs角度研究了其来源的exosome-miRNA对骨肉瘤细胞增殖的影响，存在一定的局限性，下一步需进一步研究骨肉瘤相关性MSCs在骨肉瘤血管生成、炎症因子招募、抗肿瘤免疫、化疗抵抗等方面进行深入研究。为一期临床实验做好准备。