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开云优惠体育网页版入口开云优惠体育网页版入口来源：江西开云优惠体育网页版入口开云优惠体育网页版入口库;
地区：江西
开云优惠体育网页版入口名称：利用F26G酶获得刺蒺藜皂苷抗卵巢癌活性成分的关键技术研究
批准登记号：4642020Y0134
批准登记日期：2021.10.08
主要完成人：胡蓉、姚闽、李玉云、肖草茂、张俊明、伍锡栋、黎砚书、曾宪仪、褚芳
第一完成单位：江西省医疗器械检测中心
合作单位：推荐单位：江西省药品监督管理局
开云优惠体育网页版入口类别：应用技术
所属省份：江西省
开云优惠体育网页版入口简介：藜蒺为我国传统中药材，现代被用于心血管疾病和增加性功能。其含有皂苷、黄酮、生物碱蒺藜TribulusterrestrisL1为蒺藜科蒺藜属一年生草本植物,其别名有刺蒺藜、硬蒺藜、白蒺藜、山羊头等。《中国药典》2015年版收载了蒺藜科植物蒺藜的干燥成熟果实作为蒺藜入药,其花、苗、根也有药用记载。蒺藜广布全球温带地区,该植物原产于地中海地区,现在广泛分布欧洲、亚洲、美洲、非洲和澳洲的热带地区中国各地均有分布,尤其长江以北最为普遍。蒺藜系一年生平卧草本植物，蒺藜在传统医学上具有平肝解郁、活血祛风、祛痰止咳、明目、利尿、止痒之功效,临床用于治疗头痛、头晕、气管炎、目赤多泪、高血压、皮肤瘙痒和风疹等症。《神农本草经》记载“蒺藜子，味苦，温。主恶血，破癥结，积聚，喉痹，乳难。久服长肌肉，明目，轻身。一名旁通，一名屈人，一名羽，一名升推。”现代药理实验证实，蒺藜主要皂苷类成分，能够改善心功能、缩小心肌梗塞面积、缓解心绞痛的症状、延长心绞痛的发作间期、减少心绞痛的发作次数，对陈旧性心肌梗塞伴左室功能异常者亦能减轻其胸闷、气促和心悸等症状，增加左室收缩功能和排血量。临床用于抗动脉粥样硬化，治疗冠心。慕释矗环乐稳毖阅匝懿。恢瘟聘哐。蒺藜化学成分的研究始于20世纪60年代，自80年代以来我国对蒺藜也进行了研究，以蒺藜总皂苷为主要成分的制剂心脑舒通已用于临床。迄今已证实蒺藜主要含有皂苷类、黄酮类、生物碱、多糖类等化合物。甾体皂苷是蒺藜的主要有效成分，蒺藜所含的甾体皂苷分为螺甾醇和呋甾醇两类。最近国内外学者发现蒺藜皂苷具有抗癌作用，Bedir等研究了其对4种人体肿瘤细胞(黑色素瘤细胞SK-MEL、口腔上皮细胞KB、乳腺癌细胞BT549、卵巢癌细胞SK-O-3)的作用，发现3种螺甾烷型皂苷具有显著的抑癌作用,而其余的4种呋甾醇皂苷则无上述作用。本课题组也发现蒺藜的螺甾皂苷具有抗卵巢癌作用。蒺藜经长期贮存，主要含螺甾烷醇苷，而不再是呋甾烷醇苷类，说明呋甾皂苷被某种酶酶解产生了螺甾皂苷，但依靠植物体内自身生物转化获得活性的螺甾皂苷是费时费力的。催化此反应的酶能特异的切开C26位的葡萄糖，被称作F26G，能催化呋甾向螺甾转化反应。本项目利用各种分离纯化手段从刺蒺藜中分离纯化获得F26G酶，利用F26G酶将蒺藜中总呋甾皂苷催化生成蒺藜总螺甾皂苷，进行了抗卵巢癌活性研究，从总螺甾皂苷分离纯化得到单体成分3个，从新鲜刺蒺藜获得总呋甾皂苷，从中分离纯化得到单体成分2个。为研制抗卵巢癌新药奠定基础。该项目首次从刺蒺藜中提取分离纯化获取F26G(furostanolglycoside26-O-β-glucosidase)，一种特殊的β-葡萄糖苷酶,它能特异的切开C26位的葡萄糖，使呋甾皂苷被酶解失去C26位的葡萄糖,同时F环重新环和,得到了螺甾皂苷；创新地采用生物酶技术，将蒺藜中呋甾皂苷转化成螺甾皂苷，从中筛选具有抗卵巢癌活性的有效成分，为开发一种低毒高效的中药抗卵巢癌制剂奠定有力的技术基础。该项目实施过程中申请专利1项，培养硕士研究生1名，发表论文3篇。（1）“蒺藜总皂苷含量测定研究”，《江西中医药大学学报》，2014，26（1）：59-61；（2）“蒺藜对卵巢癌裸鼠生长的实验研究”，《江西化工》，2015（2）：95-98；（3）“蒺藜总螺甾皂苷对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤抑制作用的实验研究”，《实验动物科学》，2015，32（1）：17-19。

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